使用固相萃取技術時的注意事項

1.盡量慢。
我們(men)在用固相萃取儀時，面(mian)臨的(de)(de)一個(ge)問題就是:液體應該以什么速率過柱流出(chu)，我的(de)(de)經驗是，要(yao)(yao)想效果好，就要(yao)(yao)慢，盡(jin)量慢。.
對于固相萃取(qu)儀柱中的(de)(de)填料，我們(men)如果局(ju)部(bu)放大地(di)看，能夠看到其(qi)實它們(men)是有很多的(de)(de)空際，液體流通(tong)的(de)(de)渠道很多，如果流得快，相當比例的(de)(de)待測組分還來不及與填料充分作用(yong)就地(di)從(cong)通(tong)道流失;所以(yi)要慢，給它們(men)一個(ge)充分作用(yong)的(de)(de)機會。
如何慢呢(ni)?一個竅門就是(shi)不(bu)要用配(pei)合抽氣機使用的(de)(de)所謂固相萃(cui)取儀器，而采用再普通不(bu)過的(de)(de)重(zhong)(zhong)力(li)(li)(li)法(fa)(fa)。利用重(zhong)(zhong)力(li)(li)(li)的(de)(de)作(zuo)用使液體向下流出。在實驗(yan)速(su)度上，重(zhong)(zhong)力(li)(li)(li)法(fa)(fa)遠不(bu)如吸(xi)力(li)(li)(li)法(fa)(fa)，但是(shi)在實驗(yan)效(xiao)果(guo)方面(mian)，重(zhong)(zhong)力(li)(li)(li)法(fa)(fa)遠比吸(xi)力(li)(li)(li)法(fa)(fa)優(you)勝，用吸(xi)力(li)(li)(li)法(fa)(fa)只能得到譜(pu)帶吸(xi)附，用重(zhong)(zhong)力(li)(li)(li)法(fa)(fa)卻能得到柱頭吸(xi)附，在速(su)度和效(xiao)果(guo)兩者的(de)(de)平衡中，我(wo)們還是(shi)傾向于(yu)優(you)先保(bao)證好的(de)(de)效(xiao)果(guo)。
舉(ju)例來(lai)說，一個(ge)3ml500mg的C18小柱，如果加(jia)甲醇(chun)活化，其(qi)甲醇(chun)全部流(liu)至篩板時(shi)(shi)間約為(wei)20分(fen)鐘，而在過(guo)樣品(pin)液時(shi)(shi)，25ml 的液體*多(duo)2小時(shi)(shi)可(ke)以(yi)流(liu)完(wan)，而且用(yong)重力法如果得當，工作(zuo)速率(lv)(lv)不(bu)比吸力法差(cha)很(hen)(hen)多(duo)。因為(wei)我(wo)們可(ke)以(yi)充分(fen)利用(yong)空(kong)閑(xian)時(shi)(shi)間，用(yong)吸力法*須(xu)有(you)人在旁邊守候，而重力法由于(yu)不(bu)需要用(yong)電，可(ke)以(yi)充分(fen)利用(yong)午(wu)休和(he)晚上時(shi)(shi)間過(guo)柱，液體量大時(shi)(shi)接(jie)個(ge)堆(dui)疊接(jie)頭(tou)和(he)延(yan)長管即(ji)可(ke)，安排好實(shi)驗步驟，工作(zuo)效率(lv)(lv)一樣很(hen)(hen)高。另外，重力法不(bu)需要抽(chou)氣機和(he)固相萃取儀(yi)器。
2.盡量少。
在(zai)固相(xiang)萃取(qu)儀條件選擇(ze)上，有人為了提(ti)高(gao)提(ti)取(qu)效率(lv)，盡量多(duo)(duo)加液體，或選擇(ze)填(tian)料量大的小柱，我覺得(de)大可(ke)不*如此(ci)。尤其在(zai)用重力(li)法(fa)時(shi)，由于效率(lv)高(gao)，很多(duo)(duo)情況(kuang)下是柱頭吸附，并(bing)不是所(suo)有的填(tian)料都(dou)在(zai)起作用，填(tian)料多(duo)(duo)了不僅液體流出速度會更慢，而(er)且(qie)在(zai)洗脫時(shi)的擴散會很明顯(xian)。
n. com因此建議(yi)，夠用就(jiu)行(xing)，在能保證效率時(shi)，填料盡量少，加液也不(bu)宜多(duo)。
3.實驗(yan)條件不(bu)宜過分(fen)細化(hua)。
固相(xiang)萃取儀從原理上是(shi)色譜分離，但是(shi)在(zai)操作時*好只把它作為吸附萃取劑(ji)使用，由于填(tian)料性質(zhi)、松(song)緊(jin)常有差異，因此在(zai)實(shi)際實(shi)驗中不*因為追求效果的*佳化而設計出很復雜的洗脫(tuo)程序。
在建立(li)條件中，我們應該(gai)盡量多利用現成的資料，盡快地建立(li)起體系，同時要對操作(zuo)過(guo)于復雜(za)的步驟保持(chi)警惕性，在實驗效果(guo)，實驗速(su)率和易操作(zuo)性三者中取得平(ping)衡點。
4.只用(yong)一(yi)次
固相萃取儀柱*好只用(yong)一.次。因(yin)為(wei)(wei)從嚴(yan)格的(de)(de)意義上來說(shuo)，很(hen)多物質的(de)(de)吸附(fu)(fu)是(shi)不(bu)可逆的(de)(de)，一次吸附(fu)(fu)， 無法洗脫，影響著下一次吸附(fu)(fu)，雖然有(you)人做過重復利用(yong)的(de)(de)實驗(yan)，但是(shi)總體來說(shuo)為(wei)(wei)了(le)節(jie)省- -點經(jing)費而(er)大(da)大(da)增加了(le)結果的(de)(de)不(bu)可靠性(xing)和不(bu)確定(ding)性(xing)，是(shi)很(hen)不(bu)合(he)算(suan)的(de)(de)行為(wei)(wei)。